Diabetologia：激活但功用受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次显现人体内胃溃疡球蛋白到显现1型号心血管疾病流行病学病症的成果百余人在青少年时期就有极好的详细描述，多个人体内胃溃疡球蛋白阳性的青少年之中有70%在肝细胞匹配后10短期内患上心血管疾病，而随访15年的青少年这一%增大到84%。比起之下，占流行病学1型号心血管疾病一半以上的型号1型号心血管疾病的发病有助于还没有人获得充分的科学研究。

越来越多的人开始应将用于应将于系统来定义1型号心血管疾病的成果：生物体在显现多种人体内胃溃疡球蛋白时转至第1前期，显现皮质醇间歇性时转至第2前期，显现病症时转至第3前期。一些多发人体内胃溃疡球蛋白阳性的生物体，在1期和2期，成果较比较慢，并发展为发病的1型号心血管疾病。我们在此之前详细描述了一第三组在首次监测到多种人体内胃溃疡球蛋白比对后据估计10年无心血管疾病的却是比较慢成果者，这第三组病征000人少，但必需特征极为指明。随后，我们发现人体内胃溃疡球蛋白酪氨酸CD8+T细胞内反应将在成果较快的病征之中必需不共存，但在早先发病和长期共存的心血管疾病病征之中很容易监测到。这显然指出，与成果病征比起，这些病征胃溃疡反应将的缓冲增强。

早期科学研究指出，尽管缓冲性T细胞内(Treg)数量经常性，但心血管疾病病征共存一些功能弱点，其之中都有对IL-2的反应将技能减小。此外，心血管疾病病征之中的不稳定性CD4+T细胞内显然对缓冲更具抵抗性，表现为不稳定性T细胞内的抑制作用减弱，连续性产生的Treg和体外产生的其会Treg，以及免疫球蛋白经历的CD4+T细胞内之中IL-2反应将减弱。本科学研究的目标是详细描述了CD4+缓冲性T细胞内(Treg)在一小群却是较快成果者之中的必需特征，他们的平均年岁为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

法则：BOX科学研究是一项以青年人蓝本的纵向科学研究，在21岁此表肺炎的病征亲人之中体检1型号心血管疾病的危险因素。我们在此之前详细描述了长期较快成果者的必需特征，他们保持多重人体内胃溃疡球蛋白阳性有约10年，但没有人显现心血管疾病的流行病学病症，比较慢性或非受虐胃溃疡。随后，10名独自保持无心血管疾病并愿意提供大量血液比对的较快成果者划入T和B细胞内功能分析。在目前的科学研究之中，8名比较慢成果者(SP第三组)，之中位年岁43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的人体内胃溃疡球蛋白阳性。所有的组织者都始终保持1型号心血管疾病成果的1期，尽管一些人随后失去了人体内胃溃疡球蛋白对某些免疫球蛋白的阳性反应将，然而，一名病征已经始终保持2期据估计6年，但没有人显现流行病学病症，一名病征被病人为心血管疾病，该受测者72岁，在采集试验比对时，其HbA1c急剧下降到53 mmol/mol(7%)，在数据分析之中对该ADP展开了实际上评估。转化外周血单个核能细胞内(PBMCs)，采用多参数流式细胞内拳法和T细胞内抑制作用试验评估ADP之中Treg的基频、遗传号和功能。应将用于FlowSOM和CITRUS(聚类比对、举例来说和回归)展开无行政官员聚类分析，评估Treg遗传号。

结果：与健康ADP比起，来自比较慢成果体的思绪CD4+T细胞内的行政官员聚类说明了，其会的思绪CD4+ Treg基频增大，与糖皮质激素其会的TNFR特别蛋白(GITR)解读增大有关。一名HbA1c急剧下降的病征与成果较快者和匹配的依此第三组比起，Treg谱有所不同。功能得出结论，与健康ADP比起，来自较快成果体的Treg介导的CD4+不稳定性T细胞内抑制作用值得注意受损。表现为对不稳定性CD4+T细胞内CD25和CD134解读的抑制作用增大。

由此可知1 了解的遗传号分析说明了，CD4+Treg甲型号在比较慢成果描述符之中增大。由FlowSOM作用于的Treg室，聚集在来自所有ADP的活CD4+CD45RA -细胞内上。根据标识物解读比对出新10个元簇:思绪T细胞内_1;思绪T cell_2;思绪T cell_3;思绪T cell_4;CD49b思绪T细胞内;HLA-DR + GITR +思绪T细胞内;寄存器Treg_1;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;和寄存器Treg_4。(a)应将用于9个不同Treg标识作用于的10个元簇的MST。每个路由代表一个战斗群(100个战斗群)，更大的元战斗群(10个元战斗群)在路由第三组周围着色。每个路由之中的饼由此可知暗示单个标识的解读最高级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以说明了整体标识解读。(c, d)为HD第三组(c)和SP第三组(d)作用于由此可知，以及FlowSOM辨认的每个元簇的覆盖层。(e-l)比起丰度为每个metacluster箱内支线由此可知(丰度> 0.05%)考虑到为HD和SP第三组:寄存器Treg_2 (e),寄存器Treg_3 (f),寄存器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +思绪T细胞内(h)、思绪T cell_1(i),思绪T cell_2 (j),思绪T cell_3 (k) n d CD49b思绪T细胞内(l)。绿色左上角代表**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 应将用于CITRUS的数据分析号证明，Treg基频的增大是成果较快的标志。分级门控(a - f)和果树分析(g-k)比较SP组织者和匹配的HD组织者在CD4+CD45RA−T细胞内上的差别。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群体的纪念性由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR解读展开转化，模拟FlowSOM群体。(b) HD(黑点)和SP(布氏)第三组以及ADPSP 606(绿色)之中CD25+ cd127的基频汇总由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控有界的箱内支线由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(寄存器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(寄存器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(寄存器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+寄存器T cell)。(g - i)柑桔簇棒状由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3解读其中心着色，交叉醒目新的簇被辨认为SP和HD描述符之间的不同。(j)箱内支线由此可知说明了了在SP(布氏)和HD(灰点)第三组之中，CITRUS思绪Treg_3和Treg_4的比起丰度(%)。(k)直方由此可知说明了每个簇的遗传号(粉红色)和Treg标识比起解读与历史背景解读(黄色);上列，寄存器Treg_3;下面几天后，寄存器Treg_4。历史背景与所有其他簇之中标识的解读有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

由此可知3 与健康献血者比起，成果较快者思绪treg的GITR增大。每个思绪CD4+T细胞内元簇(思绪T细胞内_1;思绪T cell_2;思绪T cell_3;CD49b +思绪T细胞内;HLA-DR + GITR +思绪T细胞内;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)监测每个解读标识的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)描述符的解读热由此可知(sp606不都有在内)。(c,d)思绪Treg_4元簇之中所有HD(灰色)、所有SP(黄色)和SP 606(绿色)的FlowSOM GITR解读串联，说明了直方由此可知(c)和汇总由此可知(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(绿色)所有ADP都有，p< 0.05(黄色)ADPSP 606和匹配的HD不都有在测试之中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs之中GITR解读，从分级门控，从所有HD(灰色)、所有SP(黄色)和SP 606(绿色)串联，说明了直方由此可知(e)和汇总由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

由此可知4 来自较快成果的CD4+ treg细胞内控制不稳定性CD4+T细胞内的技能减小。SP第三组用黄色的支线和左上角暗示，HD第三组用银色的支线和左上角暗示，绿色的支线/左上角暗示ADPsp606。应将用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内展开分选。CD4+CD25−(接收者者)被标识为CFSE, Treg按观察的%指示剂。用抗CD3 /28微珠重置细胞内，指导3天后展开流式细胞内拳法监测。(a-d)与CD4+接收者者比起应将的treg指导(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD接收者者指导。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE抑制作用一般而言(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑制作用一般而言。应将用于阳性依此(其会的组织起来细胞内不含treg)计算抑制作用一般而言。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

由此可知5 不稳定性CD4+T细胞内对较快成果的T细胞内重置的抑制作用更敏感。SP第三组用黄色的支线和左上角暗示，HD第三组用银色的支线和左上角暗示，绿色的支线/左上角暗示ADPsp606。应将用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内展开分选。CD4+CD25−(接收者者)被cfsel标识，treg按观察的%指示剂。用抗CD3 /28微珠重置细胞内，指导3天后展开流式细胞内拳法(CD25反染)和细胞内因子分析。HD Treg与HD、SP或sp606接收者者携手指导。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE抑制作用百分百余人(b)。(c,d) CD25抑制作用百分百余人(c)和CD134抑制作用百分百余人(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共指导之中的解读。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

得出结论：我们得出新的得出结论是，来自较快成果子的重置思绪CD4+Treg在GITR解读之中获得了扩展和丰富，强调了进一步科学研究Treg在1型号心血管疾病风险生物体之中的值得注意的必要性。

译文出新处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28